
[生物化学实验] 血清蛋白质的醋酸纤维素薄膜电泳分离实验报告
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简介:
本实验报告详细记录了利用醋酸纤维素薄膜电泳技术进行血清蛋白质分离的过程与结果分析,探讨其在生物化学研究中的应用价值。
一、实验目的
掌握醋酸纤维薄膜电泳法分离蛋白质的原理和方法。
二、实验原理
蛋白质是两性电解质,在pH值小于其等电点的溶液中表现为正离子,向阴极移动;在pH值大于其等电点时则为负离子,向阳极移动。血清中含有多种不同的蛋白质,它们所带净电荷因氨基酸组成、立体构象及相对分子质量等因素而异,在同一pH条件下表现出差异化的迁移速度。
具体到人血清中的主要成分包括白蛋白(Albumin)、α-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白。由于这些蛋白质的等电点大多低于7.0,因此在pH8.6的缓冲液中它们都会解离为负离子,并且向阳极移动。
实验过程中通过染色技术可以将不同种类的蛋白质区带显现出来,之后可以通过剪切薄膜并使用碱性溶液提取结合在其上的燃料来测定各组分的具体含量。另外还可以直接采用光密度扫描的方式来进行定量分析。
临床上多种疾病如肾病、弥漫性肝损害等会改变血清中白蛋白以及其他球蛋白的比例,因此该实验方法对于诊断相关病症具有重要意义。
三、实验器材
1. 醋酸纤维薄膜(2cm*8cm,厚度为120μm)
2. 人血清
3. 多个烧杯及培养皿
4. 点样器
5. 竹镊子
6. 玻璃棒
7. 电吹风
8. 六支试管
9. 恒温水浴锅
10. 电泳槽
11. 直流稳压电源
12. 分光光度计(型号:7220)
13. 剪刀
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